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Nació en Chiaravalle, provincia de Ancona, Italia
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A pesar de las dificultades económicas y sociales, obtiene el título y se convierte en la primera mujer médico en Italia. Más tarde, estudió antropología y obtuvo un doctorado en filosofía, época en la que asistió a uno de los primeros cursos de psicología experimental.
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Expuso la importancia de la educación y atención a niños con deficiencias mentales y planteó la relación entre el abandono infantil y el desarrollo posterior de la delincuencia.
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Entre los años 1898 - 1900. Trabajó con niños considerados perturbados mentalmente. Se dio cuenta de que estos niños tenían potencialidades que, aunque estaban disminuidas, podían ser desarrolladas y que eran dignos de una vida mejor sin representar una carga para la sociedad.
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Funda la primera Casa dei Bambini un lugar donde los niños y niñas tuvieran la oportunidad de aprender siguiendo sus innovadores métodos.
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Publicó su obra fundamental sobre el método de la pedagogía científica aplicada a la educación de los niños: "Il metodo della pedagogía científica applicato all 'educazione infantil nelle case dei bambini".
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Funda la Real Escuela del Método Montessori con el apoyo de Mussolini, las escuelas y los centros de formación a docentes se multiplican en Italia y se esparcen en países como Alemania.
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Medre e hijo Fundan la Asociación Montessori Internacional.
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Publica su libro El niño, el secreto de la infancia.