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En octubre de 1469 la boda de de Isabel de Castilla y Fernando de Aragón tiene lugar en Valladolid. Este matrimonio no junto ambos reinos.
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Los RRCC neutralizaron la supremacía de Francia mediante alianzas estratégicas de matrimonio entre sus hijos con Inglaterra, los Países Bajos, Austria y Portugal.
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Juana, hija de los RR.CC, recibió una excelente educación y a los 16 años, se casó con Felipe el Hermoso, hijo de Maximiliano de Austria.
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Juana se casó con Felipe el 18 de octubre de 1496 y se mudó a Flandes.
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El 25 de febrero de 1500 nació su primer hijo, Carlos, duque de Luxemburgo. En este momento ya tenían a Leonor, Isabel, Fernando, María y Catalina.
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En 1501, tras la muerte de los herederos, Juan y Felipe fueron reconocidos como herederos en Toledo y Zaragoza en 1502.
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Felipe regresa a Flandes, Juana retenida por la reina Isabel se ve obligada a separarse de él hasta 1504.
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Al fallecer Isabel en 1504, su testamento nombró a Juana heredera y a Fernando regente. Un año después las Cortes lo confirmaron.
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En 1506, Felipe logra la regencia con el apoyo de la nobleza. En este mismo año Fernando se retira a Aragón, donde su hijo con Germana de Foix muere poco después de nacer.
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Tras la muerte de Felipe el Hermoso, el Cardenal Cisneros presidió la regencia de Castilla, que duró de 1507 a 1516.
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El 15 de febrero de 1509, la reina Juana y su hija Catalina fueron llevadas a Tordesillas, donde vivió 46 años bajo custodia.
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En 1516, tras la muerte de Fernando, su nieto Carlos heredó sus reinos. Mientras él llegaba, el Cardenal Cisneros asumió la regencia.
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Durante la revuelta de las Comunidades (1520-1522), los comuneros apoyan a Juana como legítima reina, pero son derrotados.
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Juana de Castilla muere el 12 de abril de 1555 en Tordesillas.