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En este año, se casaron en Valladolid, Isabel de Castilla y Fernando de Aragón. Este matrimonio no supuso la unión de los dos reinos, únicamente
quedaron unidos en las personas de los reyes. -
Isabel y Fernando influyeron en la política de
Europa, neutralizando la supremacía de
Francia. Por medio de los enlaces matrimoniales de sus hijos establecieron alianzas con Inglaterra, Países Bajos, Austria y Portugal. -
A los dieciséis años, los padres de Juana la desposaron con Felipe el Hermoso, de dieciocho años, hijo del Emperador Maximiliano de Austria a causa del fallecimiento de su madre.
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Juana partió para Flandes. A pesar de no conocer a quien se iba a casar con ella desde el primer momento, se sintieron profundamente atraídos. La boda se celebró el 18 de octubre de 1496, y desde entonces residieron en Gante y Bruselas. Pero Juana encontró dificultades para adaptarse al nuevo país.
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El 25 de febrero de 1500 nació su primer hijo varón, a quien se le dio el nombre de Carlos, con el título de duque de Luxemburgo como heredero del trono.
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Al morir sucesivamente los herederos de Castilla y Aragón, Juana y Felipe fueron a la Península para ser reconocidos como tales. Son recibidos por los Reyes Católicos en Toledo, donde, reunidas las Cortes de Castilla el 22 de mayo de 1502, juraron como heredera de la corona a Juana y como consorte al archiduque Felipe.
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Felipe decide regresar rápidamente a Flandes, y Juana, ante la insistencia de la reina Isabel, se queda en Castilla. Esta separación durará hasta 1504 en que Juana, olvidando los consejos de su madre, se embarca para Flandes.
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El 25 de noviembre de 1504 muere la reina Isabel. En su testamento nombraba heredera a su hija Juana y juraron en 1505 a Fernando como regente del reino de Castilla.
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Juana y Felipe, no conformes con lo acordado en las Cortes de Toro, vienen a España en abril de
1506. -
Felipe murió en Burgos el 25 de septiembre de ese mismo año. Se formó un consejo de regencia
que reclamó la vuelta del rey católico. Esta segunda regencia de Fernando en Castilla duró nueve años: de 1507 a 1516. -
El 15 de febrero de 1509, la reina Juana fue trasladada, con su hija Catalina, a Tordesillas
(Valladolid). Allí vivió 46 años bajo la custodia de los marqueses de Denia. -
Al morir Fernando el Católico, en 1516, deja heredero de sus estados a su nieto Carlos, hijo de Juana y Felipe, heredero también de la corona de Castilla.
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La resistencia que van a oponer las Comunidades de Castilla al absolutismo monárquico de Carlos I (1520-22), va a hacer que la figura de la reina vuelve a adquirir importancia, al apoyarse los comuneros en Juana por considerarla la legítima soberana de Castilla. Los comuneros establecen su sede en Tordesillas, pero finalmente serán derrotados.
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Juana de Castilla muere el día 12 de abril de 1555 en Tordesillas (Valladolid).